疾病防治高寒牧区蕨麻猪猪瘟口蹄疫免疫抗体消涨规律研究

摘要：本试验随机筛选出60头O型口蹄疫和猪瘟为阴性的45日龄蕨麻仔猪为试验动物，随机分成A、B、C 3组，每组20头猪，使用猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪瘟两种疫苗同步两点注射，并采用仔猪45日龄首免，首免后第155d进行第二次补免的免疫程序，在免疫后21、50、80、110、145和180d进行免疫抗体跟踪监测，探索蕨麻猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪瘟免疫后免疫抗体的消长规律。结果表明：A、B、C组的群体保护率都较高，未见免疫副反应，效果较好。

关键词：蕨麻猪；猪瘟疫苗；口蹄疫疫苗；同步分点免疫；抗体消涨

蕨麻猪生长在海拔2,500m以上的高寒牧区，由于其终年采食草原植物“蕨麻”而得名。当地居民习惯称之为“蕨麻猪”。猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种以高热、出血等为特征的烈性、高度接触性传染病。该病是严重危害我国乃至全球养猪业的重大疫病之一，给养猪业造成很大的经济损失，我国将其列为一类动物疫病。目前甘肃省主要采取以免疫为主的综合防控策略，养猪业也十分重视该病的免疫。但近年来由于非典型猪瘟、温和性猪瘟造成的持续隐性感染，以及免疫程序不合理等因素的影响常常导致猪瘟疫苗免疫失败，给养猪场带来极大的风险。猪O型口蹄疫是由O型口蹄疫病毒引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病，该病传播迅速，发病率高，我国将其列为一类动物疫病。使用猪O型口蹄疫疫苗免疫接种是我国预防本病的重要措施。为科学制定猪O型口蹄疫的免疫程序，合理使用猪口蹄疫O型灭活疫苗和合成肽疫苗。有效控制猪瘟在甘南州的发生与流行，确保猪瘟疫苗免疫效果，2019年10月至2021年6月“非洲猪瘟形势下农牧村散养生猪程序化免疫新模式新技术研究与推广应用”项目课题组，开展了蕨麻猪猪瘟、口蹄疫两种疫苗同步分点注射后的抗体消涨规律研究，旨在探索一套合理的免疫程序，以指导全州蕨麻猪猪瘟和口蹄疫的防控工作。

1 材料与方法

1.1 材料

1）试验动物：选择合作勒秀乡、迭部县旺藏乡、卓尼县扎古录镇三乡镇的12户5头以上的合作蕨麻猪养殖户家中，选择散养的45日龄的断奶蕨麻猪仔猪各20头，选择的试验仔猪胎次、饲养状况、环境条件相近，共计60头。

2）接种疫苗：猪瘟活疫苗（细胞源）批号为（2021013）购自哈尔滨维科生物技术有限公司，猪口蹄疫O型合成肽疫苗批号为（20170710）购自申联生物医药（上海）股份有限公司。

3）试验试剂：猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒（批号：20200221，规格192孔/盒），购自青岛立见诊断技术发展中心；口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒（批号：20200615，规格200孔/盒），购自兰州兽医研究所生物科技有限公司。

4）试验仪器：酶标仪（DNM-9606），北京普朗公司；自动洗板机（DNX-96），北京普朗公司；超纯水仪（WP-UP-YJ-20），四川优普超纯科技有限公司；超声波清洗器（SB25-12DT），宁波新芝生物科技股份有限公司；台式高速冷冻离心机（3H24RI），湖南湘仪；超低温冰箱（DW-86L338J），青岛海尔医疗有限公司；自动高压灭菌器（LDZM-80KCS-III），上海申安医疗器械厂；恒温水浴锅（HH-S8），常州国宇仪器制造有限公司。

1.2 方法

1）免疫注射方法：选取45日龄断奶仔猪60头，分为A、B、C共3组，颈部右侧肌肉注射猪瘟活疫苗（细胞源）1mL，同时同步在左侧耳根后肌肉注射口蹄疫O型灭活苗1mL进行试验。

2）免疫副反应观察：免疫接种的试验猪在注射疫苗后的1～3d内，观察并记录每头猪的免疫副反应情况，检查猪只精神、食欲、行为、体温等临床特征。

3）免疫抗体检测：试验猪注射疫苗后21、50、80、110、145和180d分别测定猪瘟、O型口蹄疫两种疫苗的免疫抗体水平，按照中国农科院兰州兽医研究所改进型口蹄疫病毒O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒使用说明以及猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒使用说明进行操作及判断结果，观察其抗体消涨规律。

2 结果与分析

2.1 疫苗副反应调查结果

结果见表1，试验组60头中共有10头蕨麻猪出现了不同程度的免疫副反应，表现为体温升高、精神沉郁、食欲不振和腹泻，10头猪均在72h内自愈，表现为一般副反应，呈一过性。

2.2 O型口蹄疫抗体消长动态测定结果

结果见表2，3个试验组在免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗后产生抗体，从21d开始监测一直持续到180d，其中50～145d群体保护率一直维持在较高水平，均达到农业农村部规定的70%以上的标准，110d开始有所下降，在试验中使用了疫苗使用说明书推荐剂量免疫，可以获得较好的保护力。

2.3 猪瘟抗体消长动态测定结果

结果见表3，3个试验组在免疫猪瘟活疫苗（细胞源）后产生猪瘟抗体，从21d开始监测一直到180d，一直维持在较高水平，由此推断“同步分点注射”口蹄疫和猪瘟2种疫苗，猪瘟抗体效价不会受到影响。

3 讨论与小结

3.1 两种疫苗同步分点接种副反应较小

同步分点接种猪瘟疫苗、猪口蹄疫O型合成肽疫苗72h内，试验组出现免疫副反应的头数是：A组7头、B组5头、C组4头，分别占免疫数的35%、25%和10%，均未出现严重免疫副反应和死亡副反应，而且基本上呈一过性反应，这说明蕨麻猪本身的抵抗力强，疫苗副反应小，在临床上可以进行“同步分点”免疫注射方法。

3.2 同步分点免疫猪瘟和口蹄疫两种疫苗，试验组均得到了很好的免疫保护

首免刺激的免疫应答迅速有效，但抗体效价和群体保护率随着时间的延长有所降低。猪瘟疫苗在免疫后各个检测阶段均在要求的保护率以上，在免疫后110d（猪已经达到155日龄左右）其抗体水平依然维持较高水平，保护率达到100%，效果显著。口蹄疫的抗体水平在免疫后50d达到峰值，125日龄左右保护率达到100%。运用“同步分点”这种新的免疫方法，安全有效，免疫副反应小，可以有效地保证和提高口蹄疫、猪瘟的免疫抗体水平和质量。这种新的免疫程序进行免疫可以减少防疫人员工作量，同时能降低反复抓猪而造成的应激反应。

鉴于口蹄疫免疫1次其抗体水平产生有限。建议在运用此方法的同时，对口蹄疫在155日龄左右再实施1次强化免疫，以保证口蹄疫的免疫效果。通过蕨麻猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫抗体消涨变化的研究表明，猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫一次，即可确保高效价抗体维持至155d。猪口蹄疫O型合成肽疫苗具备免疫原性高，生物安全性好，免疫副反应小等优点，接种口蹄疫O型合成肽疫苗后猪群的群体保护率均较好，且抗体水平和群体保护率的时间较稳定，说明接种该疫苗效果好。在生产实践中值得普及推广。

3.3 通过对试验数据进行分析，建议蕨麻猪免疫程序如下

仔猪45日龄首免O型口蹄疫疫苗，同步另一侧注射猪瘟，在155日龄左右再实施1次O型口蹄疫和猪瘟强化免疫。此外，口蹄疫和猪瘟的防控还应该加强猪群的饲养与管理、疫苗的质量与操作等因素有关，只有这样才能有效减少蕨麻猪口蹄疫和猪瘟的发生，从而提高农牧民的收入。

参考文献：略

作者：杨耀，张震，陈文景，丁桂芳，李平/甘南州动物疫病预防控制中心;王子坚，崔王芳/甘肃省动物疫病预防控制中心

来源：《中国动物保健》2022年12月刊

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